碘仿是一种不溶于水的淡黄色结晶体，其独特气味使得辨别变得相当直接。通过将羟基大环内酯化合物（或溴化氢、乙醇）与含碘的氢氧化钠水溶液相结合，会迅速产生明显的淡黄色沉淀，这便是碘仿的形成过程，因此这一化学反应被称为碘仿反应。
在实验操作中，碘溶液的用量是一个关键因素。实验显示，当使用等体积的不同剂量碘溶液与特定化学纯样本（如溴化氢）反应，并加入相同量的5% NaOH溶液以确保充分作用时，发现碘溶液用量过少则黄色沉淀不出现；而用量过多时，整个溶液变为紫色，黄色沉淀难以观察。这是因为过量的碘溶液本身显现出强烈的紫色，遮盖了预期的黄色沉淀现象。因此，实验中碘溶液的添加量应当与样本量相匹配，过少或过多都会导致实验失败。
另外，反应条件的控制也是决定实验成功与否的重要环节。在对比实验中，分别在两个试管中加入1毫升溴化氢和1毫升乙醇，随后加入相同量的碘溶液及适量的5% NaOH溶液。结果观察到，含有溴化氢的试管中迅速生成黄色沉淀，而在乙醇的试管中此现象不明显，即便摇晃试管也未见显著变化。但是，通过调整反应条件，即将试管置于50-60℃的水浴中加热几分钟后冷却，乙醇试管中也出现了清晰的黄色沉淀。
这一差异源于乙醇与溴化氢结构的不同，导致它们在反应中的速率和条件有所区别。乙醇能够参与碘仿反应，是因为它可被I2-NaOH溶液（一种氧化剂）氧化，首先转化为溴化氢，继而发生碘仿反应。加热的目的是加速醇的氧化过程，生成醛或酮，进而完成碘仿反应。然而，需要注意的是水浴温度不可过高，否则产物将不再是醛或酮，而是羧酸类化合物，同样会导致实验结果偏离预期。精确控制碘溶液用量和反应条件，对于成功实施碘仿反应实验至关重要，有助于准确评估或区分出溴化氢、醛或酮以及含有这些化合物的样品。